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高分子聚合磁珠Magnefy在核酸提取中的应用
人阅读 发布时间:2021-02-20 13:35
Solid Phase Reversible Immobilisation(固相载体可逆化固定法)核酸提取法,最早由Whitehead 研究所在1995年提出,用于快速高效纯化PCR产物。方案中采用了磁性微球,可以实现快速自动化提取。
与传统的二氧化硅磁珠法不同,SPRI方案基于高分子PS磁珠,其结构如下:
内核为PS,夹层为四氧化三铁,外层为高分子聚合物,上面修饰了羧基。
SPRI的原理众说纷纭,一般认为核糖和磷酸形成的亲水骨架让核酸溶于水相中,当与高浓度的PEG相遇时,核酸水溶性为醇基破坏,加上高盐作用(盐析),使核酸由水合态转为絮状→球状→多聚体吸附在珠子表面。在洗脱时,由于核酸恢复水合状态(带负电),从而为珠子表面的羧基所排斥,易于释放。
目前市面上常见的此类磁珠大多源自Seradyn公司的 Seramag (如Beckman的 AMPure XP)。 Bangslabs 推出的Magnefy 是一款可媲美 Seramag的核酸提取磁珠,具备以下优点:
与传统的二氧化硅磁珠法不同,SPRI方案基于高分子PS磁珠,其结构如下:
内核为PS,夹层为四氧化三铁,外层为高分子聚合物,上面修饰了羧基。
SPRI的原理众说纷纭,一般认为核糖和磷酸形成的亲水骨架让核酸溶于水相中,当与高浓度的PEG相遇时,核酸水溶性为醇基破坏,加上高盐作用(盐析),使核酸由水合态转为絮状→球状→多聚体吸附在珠子表面。在洗脱时,由于核酸恢复水合状态(带负电),从而为珠子表面的羧基所排斥,易于释放。
目前市面上常见的此类磁珠大多源自Seradyn公司的 Seramag (如Beckman的 AMPure XP)。 Bangslabs 推出的Magnefy 是一款可媲美 Seramag的核酸提取磁珠,具备以下优点:
- 可以通过调节PEG及盐浓度,对不同大小片断的核酸进行针对性的纯化
- 相对于硅磁珠,Magnefy磁珠的悬浮性更好,磁珠与核酸结合的机会更充分,纯化效率更高,更适配全自动核酸提取仪器。
- 在极酸pH1.0 及极碱pH14条件下非常稳定
- 在高盐浓度下(5M 氯化钠)条件下非常稳定
- 在硫氰酸胍(1-6M)下非常稳定
- 去离子水反复洗涤 (>10次),无聚集,无漏磁,无变形产生
- 在95℃ PCR变性条件下(50个循环),磁珠无变形,磁反响时间无变化
- 在同等质量下,Magnefy的价格只有Seramag的2/3
- Magnefy的月生产能力>100L, 货源稳定可靠