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磁珠的温度稳定性
278 人阅读发布时间:2023-04-07 15:38
核酸提取磁珠或是修饰有Strep/Biotin的珠子,后续操作可能会是PCR。在一个较高的温度范围内循环扩增会不会影响磁珠本身的稳定性或是上面的strep/biotin?
如果是常见Thermo的Dynabeads, Ampurexp 或是Bangslabs的Magnefy, 在常规的PCR条件都是很稳定,以下为Magnefy磁珠温度验证结果:
验证的条件是1mg/mL beads 在 10mM Tris pH9缓冲液中,95ºC 5 分钟,然后再以5分钟/扩增,共进行 50 循环。
从图中可以看到微球几乎没有任何变化,仍然非常稳定。 如果是接有strep 或是biotin, 如果是通过交联结合的,在100摄氏度左右也是非常稳定的,特别是形成strep-biotin后。当然也有人认为高温会让通过吸附作用连接在磁珠表面的strep/biotin 解离,所以建议选这类产品时,最好是用化学交联的珠子。
以上仅是针对我熟悉的磁珠。